本作将设置4个章节，分别是《生化1》、《生化2》、《生化3》和《生化4》，每章有两名角色可供选择，一代对应角色是吉尔和克里斯、二代的可选人物为克莱尔和里昂、三代对应的则是吉尔和卡尔罗斯、四代的主人公是里昂和艾达。另外，本作中的所有角色都有各自独有的近身格斗技以及专属的武器装备，但所有角色在游戏中只能同时携带两种武器，当获得新武器时玩家就必须进行一番取舍，但在游戏中收集到的所有武器并不会消失，而是可以在新增的“街机模式”中使用。